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            文章詳情

            如何形成厭氧培養箱操作室的環境

            日期:2021-11-29 19:51
            瀏覽次數:717
            摘要:

            厭氧培養箱是一種可在無氧環境下進行**培養及操作的專用裝置,可培養*難生長的厭氧生物在大氣中操作時接觸氧而死亡的危險性。

              1. 厭氧培養箱應安放在溫差較小、操作方便的位置,應避免陽光直曬和遠離采暖設備,放置平穩;

              2. 將混合氣瓶、氮氣瓶安放平穩,并分別裝好減壓閥(含壓力表),安置在適當位置;

              3. 接上氣路并檢查氣路,為防止漏氣,必要時可在各接管處用密封膠粘合;

              一、皓莊厭氧培養箱操作室厭氧環境形成:

              1. 按使用要求放置好必要的附件和器具,并向操作室內放入二個無毒塑料袋;

              2. 通電源開照明燈,開溫控儀,調節所需溫度及安全溫度;

              3. 操作室內放入1000g鈀粒(封閉)和500g干燥劑,并放入美蘭指示劑(封閉);

              4. 關緊取樣室內外門,并抽真空校驗;

              5. 操作室內**次置換(氮氣置換):

              A. 先用橡皮管插入操作室內進氣口,另一頭插入塑料袋;

              B. 接通氮氣進氣路,打開氮氣控制閥1,使二只塑料袋充足氮氣,關閉閥門1,然后扎緊袋口;

              C. 把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊;

              D. 把塑料袋內氮氣漸漸放于操作室內,至全部放出。

              6. 操作室**次置換(氮氣置換)重復一次充氮過程,取樣室先抽真空,并注意隨時用腳踏開關開閉排氣。

              7. 操作室第三次置換(混合氣體置換):(混合氣體配比為N2 85%、H2 10%、CO2 5%)

              A. 調換氣路打開混合氣閥3進氣,充氣時取樣室先抽真空,并隨時用腳踏開關開閉排氣;

              B. 混合氣充滿塑料袋后,關掉混合氣閥并打開閥5,使混合氣經過流量計,調整流量計,流量為每分鐘10ml左右;

              C. 把塑料袋內混合氣漸漸排于操作室內;

              D. 通過三次換氣后,操作室內氣體含氧量已處于極微量狀態。

              8. 操作室內打開粑粒除氧劑,接通除氧催化器電源進行催化除氧,一小時后開美蘭指示劑(美蘭安瓶)觀察其變**況,不變色為操作室內達到厭氧環境;

              9. 開紫外線**燈,室內進行**處理,**時間按具體實驗自定。

              2、菌種的置入和培養:

              1. 檢查取樣室內門并關緊之;

              2. 打開取樣室外門,將菌種放入取樣室后即關上外門;

              3. 取樣室充氮置換三次過程:打開真空泵,先抽真空度500ml汞柱(66kPa)以上停,然后人工打開氮氣閥2進氣,使指針回復零位,關掉閥2。**次重復操作一次。第三次操作時,使真空度500ml汞柱(66kPa)以上停,然后打開閥4進混合氣,使指針回復零位,后掉閥4。取樣室充氮置換三次過程結束;

              4. 如選定真空度較低就需要增加置換的次數;

              5. 取樣室內外門開啟、關緊,再抽低真空度100ml汞柱(13kPa)檢驗;

              6. 厭氧培養箱需要長期連續使用的條件:

              A. 每天在操作室內打開美蘭指示劑觀察,如不正常就必須重新換氣;

              B. 要長期連續輸入微量的混合氣體,使補進的氮氣能和微量的氧結合通過催化吸收,保證室內厭氧狀態,補入混合氣流量選定為每分鐘10ml左右;

              C. 連續培養運行**,更換一次除氧劑和干燥劑。

              7. 操作室內培養室內室溫度可任意選擇和控制。

              8. 混合氣瓶、氮氣瓶輸出壓力調整:調節減壓閥,使輸出壓力0.1Mpa左右。

              注意事項

              1. 儀器盡可能地安裝于空氣清凈、溫度變化較小的地方;

              2. 開機前應**熟悉和了解各組成配套儀器、儀表的使用說明,掌握正確使用方法;

              3. 培養物放入必須是在操作室內達到優良厭氧環境后放入;

              4. 如發生故障(停氣等原因)操作室內仍可保持12小時厭氧狀態(超過12小時則根據需要把培養物取出另作處理);

              5. 經常注意氣路有無漏氣現象;

              6. 調換氣瓶時,注意要扎緊氣管,避免流入含氧氣體;

              7. 真空泵按要求使用,定期檢查加油。

            蘇公網安備 32048202000235號

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